中文名稱：大鼠 RBP4 ELISA試劑盒（酶聯(lián)免疫檢測(cè)法）

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96

產(chǎn)品存儲(chǔ)：低溫、避光保存

產(chǎn)品庫(kù)存：現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品分類：酶聯(lián)免疫試劑盒

產(chǎn)品用途：僅供檢測(cè)，不得用于臨床

發(fā)貨方式：專門(mén)快遞免費(fèi)送貨上門(mén)

實(shí)驗(yàn)步驟：

使用前將各種試劑取出放置30分鐘，平衡至室溫，所有標(biāo)準(zhǔn)品和樣品必需設(shè)置平行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，快速加入試劑至樣品中，立即漩渦震蕩2秒混勻。

1. 依據(jù)實(shí)驗(yàn)鍵盤(pán)紙決定酶標(biāo)條的使用量，將剩余的酶標(biāo)條連同干燥劑一起放回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各個(gè)微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特異結(jié)合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP標(biāo)準(zhǔn)品）。

4. 移取100μL cAMP標(biāo)準(zhǔn)品至相應(yīng)的孔。

5. 移取100μL樣品至相應(yīng)的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特異結(jié)合）孔。

7. 移取50μL 偶聯(lián)酶至各孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗體工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特異結(jié)合）孔。

9. 將酶標(biāo)孔置于孔板振動(dòng)器上，250~500rpm，室溫孵育2小時(shí)。

10. 在吸水紙上拍干微孔內(nèi)溶液，加洗滌液400μL每孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗滌，清空各微孔，在干凈的無(wú)塵吸水紙上輕巧酶標(biāo)板數(shù)次，以確保沒(méi)有洗滌液殘留。

12. 加5μL 偶聯(lián)酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL顯色底物溶液，于室溫靜置5~30分鐘。（顯色底物A和B需在臨用前15分鐘內(nèi)等體積混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL終止液，終止后立即讀數(shù)。

15. 清除酶標(biāo)儀Blank（空白）孔值，讀取450nm處的光密度值，在570nm至590nm之間好有修正，如果酶標(biāo)儀不能自動(dòng)清除Blank(空白)孔值，那么手動(dòng)扣除每個(gè)讀數(shù)的Blank（空白）孔光密度值。

注意事項(xiàng)：

1. 用戶在初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。

2. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。

3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。

4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請(qǐng)于2-8℃保存，標(biāo)準(zhǔn)品、生物-素標(biāo)記抗體工作液、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用，請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、生物-素標(biāo)記抗體工作液或、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。

5. 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

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