猴胚胎腎上皮細胞(marcl45)
細胞特性
1)來源：腎
2)含量：>lxl06 個/mL
3)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
4)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：（1)干冰運輸，收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇；（2)存活細胞，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
 
細胞用途：僅供使用。
細胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1.準備 D/F12 培養(yǎng)基(D/F12, GIBCO);北美胎牛血清(UnitedStates，GIBCO)，10%;雙抗 1%。
2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)濕度為70%-80%。
3.凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
 
猴胚胎腎上皮細胞(marcl45)2)細胞處理：
1.復蘇細胞：將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)基后吹句。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，加培養(yǎng)基至6ml。
2.細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口 lm丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于3C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2ml*培養(yǎng)基終止消化。
輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
將細胞懸液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。3.細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。
 
下面T25瓶為例；
1.細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入lml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO迅速混勻，按每lml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便次拿取。
 
猴胚胎腎上皮細胞(marcl45)注意事項：
收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電聯(lián)。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。